细胞趋化/迁移/侵袭（编号：1011）

一、迁移

细胞迁移是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一，是机体正常生长发育的生理过程，也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移。检测细胞迁移能力的实验包括划痕实验和Transwell实验。

（一）实验原理

细胞划痕实验是简捷测定细胞迁移运动与修复能力的方法，在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上，用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分的细胞，然后继续培养细胞至实验设定的时间是一种简单易行的检测细胞运动的方法，实验成本低，可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。Transwell的基本原理是将transwell小室放入培养板中，小室内称为上室，培养板内称为下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，上室内添加上层培养液，下室内添加下层培养液。将细胞种在上室内，由于膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。

（二）实验流程

Transwell实验

1. 采用未铺 Matrigel 胶的 Transwell 小室用于实验；

2. 制备细胞悬液；

3. 接种细胞；

4. 检测穿过的细胞数；

5. 结果统计分析

（三）客户提供

细胞株(冻存株或培养好的细胞)，所需药品，药物处理方式和浓度。

（四）公司提供

基本实验步骤、图片、数据分析结果、剩余药品。

实验周期：大约2-3周左右，具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。

二、侵袭：

研究趋化因子或其他营养物质对细胞侵袭的影响

（一）实验原理

将细胞种于上室，趋化因子等种于下室，细胞会向营养成分高的下室跑。与迁移实验不同是侵袭实验需要在小室聚碳酸酯膜上铺设一层基质胶。用以模仿体内细胞外基质，细胞欲进入下室，先要分泌基质金属蛋白酶（MMPs）将基质胶降解，方可通过聚碳酸酯膜。计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的侵袭能力。

（二）实验流程

实验材料仪器：超净工作台、CO2培养箱、生物倒置显微镜

实验内容与方法：

1. 将细胞种于上室，趋化因子等种于下室

2. 培养一定时间后观察计数细胞形态或测定相关理化性质

（三）客户提供

1、实验信息（客户提供）：

2、实验材料提供

（1）样本材料：生长状况良好的宿主细胞株，细胞培养条件

（2）试剂：Transwell小室需客户提供或委托我公司代购，如有药物则提供加药浓度

（四）公司提供

提交实验报告书（实验试剂与设备、实验过程、结果分析、原始数据、细胞图片等）；