ELISA检测（编号：1109）

一、服务介绍

ELISA 检测全称(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA) 指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上，进行免疫反应的定性和定量方法。

本公司采用的试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测指标的水平。用纯化的单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的待测抗原会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。生物素与亲和素特异性结合；生物素化的抗体与结合在单抗上的抗原结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有待测物质，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂变蓝色，加终止液变黄。在450nm处测OD值，待测物质的浓度与OD₄₅₀值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中待测物质的浓度。

二、实验内容

1、客户明确待测样本的种属、来源、数量

2、 收集样本（详见备注）

3、订购相应的ELISA试剂盒，

4、实验完成，交付结果。

备注：客户在收集样本前必须清楚检测的成份是否稳定，需要周期收集样本，请将样本及时分装后储存在-20℃或-70℃，因冰室与室温温差较大，蛋白极易降解，所以请避免反复冻融。

①. 血清：室温自然凝固10-20分钟，3000转/分，离心20分钟，收集上清

②. 血浆：一般选用EDTA作为抗凝剂，混合10分钟后，3000转/分，离心20分钟，收集上清

③. 细胞培养上清：检测细胞分泌性的成份时，用无菌管收集；检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到10⁶/ml左右，通过反复冻融，以使细胞破坏释放胞内成份，3000转/分，离心20分钟，收集上清，

④. 样本保存过程中如出现沉淀，应再次离心，

⑤. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶（HRP）的活性。

三、客户提供

1、实验样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等，邮寄前请与我公司技术支持沟通确认。

2、检测试剂盒（或用我公司提供的检测试剂盒）。

3、尽可能详细的背景资料。

四、公司提供

1、标准曲线

2、各样本的OD值，浓度值

3、完整的实验报告。